Josie e as Gatinhas é a versão para cinema de uma história em quadrinhos americana muito popular nos anos 70. Neste filme sobre um pequena banda formada só por garotas, Josie e as Gatinhas, três lindas garotas de olho no sucesso, Jose (Rachel Leigh Cook), Melody (Tara Reid), e a durona Valerie (Rosario Dawson), são lançadas para o topo das pesquisas. Mas, logo após serem descobertas por Wyatt (Alan Cumming) e tornarem-se grandes estrelas de rock, descobrem uma grande conspiração encabeçada por Fiona (Parker Posey), uma tirana que comanda o mundo das gravadoras e planeja controlar a mente da juventude americana...